Título | Avaliação in vitro do potencial antibacteriano e modulador da resistência bacteriana do óleo essencial de eugenia uniflora l. e eugenia jambolana lam. em associação com as luzes de LED |
Data da Defesa | 18/04/2017 |
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Banca
Examinador | Instituição | Aprovado | Tipo |
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Prof.ª Dr.ª Fabíola Fernandes Galvão Rodrigues | Centro Universitário Doutor Leão Sampaio | Sim | Titular | Prof.ª Dr.ª Maria Izabel Florindo Guedes | Universidade Estadual do Ceará | Sim | Presidente | Prof. Dr. Edinardo Fagner Ferreira Matias | Centro Universitário Doutor Leão Sampaio | Sim | Titular | Prof. Dr. Henrique Douglas Melo Coutinho | Universidade Regional do Cariri | Sim | Titular |
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Palavras-Chaves | Atividade antibacteriana. Atividade moduladora. Concentração inibitória mínima. Antibióticos. Eugenia uniflora. Eugenia jambolana. |
Resumo | Eugenia uniflora (OEEu) e Eugenia jambolana (OEEj) destacam-se por seu potencial antibacteriano, citotóxico, antiinflamatório, dentre outras atividades associadas. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antibacteriana e moduladora da resistência bacteriana do OEEu e OEEj associados às luzes de LED azul e vermelho. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) dos óleos foi determinada pelo método de microdiluição em caldo com as cepas padrão e multirresistentes de Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa. Para avaliação da atividade moduladora dos antibióticos foram utilizadas as metodologias de microdiluição em placas com os aminoglicosídeos (gentamicina e amicacina) os quais foram diluídos seriadamente nos poços contendo o meio de cultura Brain Heart Infusion Broth – BHI a 10% e a suspensão com o inóculo da cepa multirresistente, com o OEEu e OEEj na concentração subinibitória (CIM/8). A atividade moduladora também foi avaliada pelo método contato gasoso sem exposição às luzes de LED com os antibióticos aminoglicosídeos (amicanina, gentamicina e eritromicina), onde os microorganismos de cepas multirresistentes (Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa) foram semeados em placas de Petri contendo BHI e os óleos diluídos em DMSO. Pelo método de modulação por contato gasoso com exposição das placas às luzes de LED azul e vermelhoforam utilizados os antibióticos fluoroquinolonas (ciprofloxacino e norfloxacino) e cepas de bactérias multirresistentes (Staphylococcus aureus eEscherichia coli).A caracterização dos componentes químicos foi realizada através Cromatografia Gasosa Acoplada a Espectrometria de Massa – CG-MS onde foram obtidos como componentes marjoritários o Isofurano-germacreno com o percentual de 61,69% e α-pinene com 48,09% para OEEu e OEEj respectivamente. Na avaliação da CIM dos óleos essenciais o crescimento de todas as linhagens bacterianas de S. aureus e E.coli padrão testadas apresentaram valores de CIM ≥ 1024μg/mL. Para as linhagens multirresistentes de S.aureus o OEEu mostrou uma CIM ≥ 256 μg/mL e com o OEEj teve CIM ≥ 128 μg/mL e frente a E.colios dois óleos apresentaram CIM ≥ 1024μg/mL. Nos testes de modulação por microdiluição quando combinado o OEEu com a amicacina e a gentamicina frente a S. aureus e E.coli foi observado uma redução na atividade antibiótica. Exceto, na combinação do óleo com a gentamicina frente a E.coli, onde houve antagonismo. No entanto, na combinação dos antibióticos amicacina e gentamicina com OEEj frente às bactérias E.coli, foi possível observar sinergismo. No teste de modulação através do contato gasoso sem exposição ao LED com OEEU e OEEj combinado com a eritromicina, foi observado aumento de halo indicandoantagonismo frente às bactérias P.aeruginosa. Na modulação através do contato gasoso com exposição ao LED com OEEu e OEEj houve sinergismo em todos os testes quando associados aos antibióticos e a luz de LED azul. Entretanto, ao associar os antibióticos com os óleos e as luzes de LED frente às bactérias testadas, houve indiferença nos testes, com exceção do efeito antagônico da associação do antibiótico norfloxacino, OEEj e luz de led azul. Dessa forma, são necessárias mais pesquisas para elucidar os efeitos antagônicos e sinérgicos desses produtos. |
Abstract | Eugenia uniflora (OEEu) and Eugenia jambolana (OEEj) stand out for their antibacterial, cytotoxic and anti-inflammatory potential, among other associated activities. Thus, this work aimed to evaluate the antibacterial activity and modulator of bacterial resistance of OEEu and OEEj associated with blue and red LED lights. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of the oils was determined by broth microdilution method with the standard and multiresistant strains of Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. To evaluate the modulating activity of the antibiotics, plaque microdilution methodologies with the aminoglycosides (gentamicin and amikacin) were used, which were serially diluted in the wells containing the Brain Heart Infusion Broth - BHI 10% culture medium and the suspension with the inoculum Of the multidrug resistant strain, with OEEu and OEEj in the subinhibitory concentration (MIC / 8). The modulating activity was also evaluated by the gaseous contact method without exposure to LED lights with aminoglycoside antibiotics (amicanin, gentamicin and erythromycin), where microorganisms from multiresistant strains (Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa) were seeded in Petri dishes Containing BHI and the oils diluted in DMSO. The fluoroquinolone antibiotics (ciprofloxacin and norfloxacin) and strains of multiresistant bacteria (Staphylococcus aureus and Escherichia coli) were used by the gaseous modulation method with exposure of the plates to the blue and red LED lights. The characterization of the chemical components was carried out through Gas Chromatography Coupled to Mass Spectrometry - CG-MS where Isofuran-germacrene with 61.69% and α-pinene with 48.09% for OEEu and OEEj respectively. In the MIC evaluation of essential oils the growth of all bacterial strains of S. aureus and E.coli standard tested showed MIC values ≥ 1024 μg / mL. For S. aureus multiresistant strains, OEEu showed a MIC ≥ 256 μg / mL and with OEEj it had MIC ≥ 128 μg / mL and, in contrast to E.coli, the two oils presented MICs ≥ 1024 μg / mL. In the microdilution modulation tests when OEEu was combined with amikacin and gentamicin against S. aureus and E. coli, a reduction in antibiotic activity was observed. Except in the combination of the oil and the gentamicin against E.coli, where there was antagonism. However, in the combination of the antibiotics amikacin and gentamicin with OEEj against E.coli bacteria, it was possible to observe synergism. In the modulation test through the gaseous contact without LED exposure with OEEU and OEEj combined with erythromycin, an increase of halo indicating antagonism against P.aeruginosa bacteria was observed. In the modulation through the gaseous contact with LED exposure with OEEu and OEEj there was synergism in all the tests when associated with the antibiotics and the blue LED light. However, when antibiotics were associated with the oils and LED lights against the tested bacteria, there was indifference in the tests, with the exception of the antagonistic effect of the combination of the antibiotic norfloxacin, OEEj and blue led light. Thus, further research is needed to elucidate the antagonistic and synergistic effects of these products. |