| Título | IMUNOSEXAGEM E CRIOPRESERVAÇÃO ESPERMÁTICA EM MEIO À BASE DE ÁGUA DE COCO EM PÓ (ACP102c) NA ESPÉCIE OVINA |
| Data da Defesa | 17/03/2020 |
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Banca
| Examinador | Instituição | Aprovado | Tipo |
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| Prof.ª Dr.ª Antonia Debora Sales | Universidade Estadual do Ceará | Sim | Titular | | Prof.ª Dr.ª Cristiane Clemente de Mello Salgueiro | Universidade Estadual do Ceará | Sim | Titular | | Prof. Dr. Assis Rubens Montenegro | Universidade Estadual do Ceará | Sim | Titular | | Prof. Dr. José Ferreira Nunes | Universidade Estadual do Ceará | Sim | Presidente |
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| Palavras-Chaves | Ovinos. Sexagem. ACP. Sêmen. |
| Resumo | A sexagem espermática é uma biotécnica que cada vez mais está sendo utilizada,
pois a determinação do sexo da cria traz aumentos na produtividade do agronegócio.
No entanto, a citometria de fluxo, técnica mais utilizada, apresenta altos custos, é
muito dispendiosa, restrita, e produz um baixo número de espermatozoides sexados
por hora. Como uma das alternativas, a imunossexagem, que utiliza anticorpo
monoclonal para detecção de antígenos de superfície sexo-específicos, têm
apresentado resultados satisfatórios in vivo em bovinos e suínos, além de demonstrar
ser uma técnica simples e com custos inferiores aos de mercado. Diante disso, o
trabalho teve como objetivo avaliar o sêmen ovino submetido à técnica de
imunossexagem seguida de criopreservação em meio à base de água de coco em pó.
O experimento foi realizado no Laboratório de Tecnologia do Sêmen Caprino e Ovino
em Fortaleza – CE, em parceria com a propriedade Fazenda HCG, localizada no
município de Aquiraz – CE. Foram utilizados dois carneiros de raça Santa Inês, puro
de origem com idade média de 3 anos. O experimento foi realizado em duas etapas:
(1) Criopreservação de espermatozoides ovinos imunossexados e diluídos em meio
ACP-102c e avaliação com 1 semana após a criopreservação e (2) Avaliação das
mesmas amostras criopreservadas, após 1 ano do crioarmazenamento. As amostras
da etapa 1 e 2 foram avaliadas quanto à cinética espermática por análise
computadorizada, utilizando o software Sperm-Class Analyzer® e subjetivamente, e
avaliadas quanto as integridades de membranas e alterações morfológicas através da
utilização e confecção de esfregaços corados com eosina nigrosina. Os resultados
foram submetidos à análise estatística e expressos em média ± desvio padrão (p <
0,05). Quanto a criopreservação, os resultados demonstraram que não foram
observadas diferenças estatísticas significativas (P > 0.05) tanto entre os animais
como entre o período de avaliação, exceto no parâmetro de espermatozoides normais
entre os animais, no qual o animal um apresentou menor percentual (P < 0.05). Já na
relação custo-benefício, a técnica de citometria de fluxo apresentou-se como a técnica
mais laboriosa e de alto custo, enquanto a imunossexagem associada a
criopreservação em diluente ACP102c demonstrou ser a técnica de maior praticidade
tanto entre as técnicas de sexagem espermáticas, como também entre os diluentes
de conservação, com um custo inferior ao da citometria de fluxo e um maior campo
de aplicação, apresentando um melhor custo-benefício. O processo de
imunossexagem associado ao uso do diluente água de coco em pó (ACP102c) pode
ser utilizado para criopreservação de sêmen da espécie ovina sem distinção de
indivíduo e com período de viabilidade/qualidade espermática semelhante ao sêmen
convencional não sexado, como também, mostrou-se como a técnica de melhor custobenefício
para a espécie ovina. |
| Abstract | Sperm sexing is a biotechnology that is being used more and more, because
determining the sex of the offspring brings increases in agribusiness productivity.
However, flow cytometry, the most used technique, has high costs, is very expensive,
restricted, and produces a low number of sexed sperm per hour. As one of the
alternatives, immunosexing, which uses monoclonal antibody to detect sex-specific
surface antigens, has shown satisfactory results in vivo in bovine and swine, in
addition to proving to be a simple technique and with lower costs than the market.
Therefore, the work aimed to evaluate the ram semen submitted to the immunosexing
technique followed by cryopreservation in a powdered coconut water medium. The
experiment was carried out at the Goat and Ram Semen Technology Laboratory in
Fortaleza - CE, in partnership with the Fazenda HCG property, located in the
municipality of Aquiraz - CE. Two purebred Santa Inês rams with an average age of 3
years were used. The experiment was carried out in two stages: (1) Cryopreservation
of ram sperm imunosexed and diluted in ACP-102c medium and evaluation 1 week
after cryopreservation and (2) Evaluation of the same samples cryopreserved, after 1
year of cryopreservation. The samples from steps 1 and 2 were evaluated for sperm
kinetics by computerized analysis, using the Sperm-Class Analyzer® software and
subjectively, and evaluated for membrane integrity and morphological changes
through the use and making of smears stained with eosin nigrosine. The results were
submitted to statistical analysis and expressed as mean ± standard deviation (p <0.05).
As for cryopreservation, the results showed that there were no statistically significant
differences (P> 0.05) between animals and between the evaluation period, except for
the normal sperm parameter between animals, in which animal one had a lower
percentage (P <0.05). In the cost-benefit ratio, the flow cytometry technique presented
itself as the most laborious and high-cost technique, while immunosexing associated
with cryopreservation in ACP102c diluent proved to be the most practical technique
both among sperm sexing techniques, as well as among conservation diluents, with a
lower cost than flow cytometry and a wider field of application, presenting a better costbenefit
ratio. The immunosex process associated with the use of powdered coconut
water diluent (ACP102c) can be used for cryopreservation of ram sperm without
distinction of individual and with a period of viability / sperm quality similar to
conventional non-sexed sperm, as well as showed as the most cost-effective technique
for ram. |
