| Título | Extrato hidroalcoólico de própolis vermelha: uma alternativa para o desenvolvimento de meios de conservação de ovários de vacas |
| Data da Defesa | 14/12/2023 |
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Banca
| Examinador | Instituição | Aprovado | Tipo |
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| Prof.ª Dr.ª Aline Cavalcanti de Queiroz | Universidade Federal de Alagoas | Sim | Suplente | | Prof.ª Dr.ª Ana Soraya Lima Barbosa | Centro Universitário CESMAC | Sim | Titular | | Prof.ª Dr.ª Camila Calado de Vasconcelos | Centro Universitário CESMAC | Sim | Presidente | | Prof. Dr. Axel Helmut Rulf Cofré | Centro Universitário CESMAC | Sim | Titular |
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| Palavras-Chaves | Produtos naturais; Antioxidantes; Viabilidade celular; Bos taurus |
| Resumo | A utilização de produtos naturais com elevado potencial antioxidante, como a própolis vermelha originária do Estado de Alagoas, podem constituir uma alternativa viável para a conservação de oócitos durante o transporte de ovários de animais de alto valor zootécnico, visto que minimizam os danos celulares provocados pelo estresse oxidativo pela redução do aporte sanguíneo. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o uso do extrato hidroalcoólico de própolis vermelha como alternativa para conservação de folículos ovarianos de vacas. A amostra de própolis vermelha bruta foi adquirida em apiário localizado na cidade de Marechal Deodoro, Alagoas e, posteriormente realizou-se a obtenção do extrato hidroalcoólico através da técnica de maceração empregando o álcool etílico 70% v/v como solvente extrator. A capacidade antioxidante desta solução foi determinada a partir do conteúdo total de fenóis e da capacidade sequestradora de radicais frente ao radical 2,2-Difenil-1-picril-hidrazina (DPPH●). A partir desta solução estoque realizou-se diluições seriadas até se obter às concentrações de 1 (C1), 2 (C2), 5 (C5) e 10% v/v (C10), sendo estas utilizadas como meio de conservação de tecido ovariano. No estudo foram utilizados ovários (n=5 pares) de vacas adultas, que foram fragmentados e armazenados a 4° C durante 4 (T4) e 12 horas (T12), seguido de processamento histológico clássico. Após a obtenção dos dados foram realizadas análises multivariadas como a distância euclidiana média como uma medida de dissimilaridade (D2) e aplicado o método de otimização de Tocher. O extrato hidroalcoólico de própolis vermelha de Alagoas produzido apresentou capacidade antioxidante capaz de preservar a morfologia folicular do tecido ovariano a depender da categoria avaliada nas condições experimentais investigadas. O extrato obtido apresentou conteúdo total de fenóis de 462,25 ± 14,99 mg de equivalentes de ácido gálico/g de extrato seco e 32,12 % de inibição frente ao radical DPPH● e CI50 de 10,06 µg mL-1. Constatou-se que 27,8% dos folículos do controle a fresco se mantiveram intactos (normais), enquanto 72,2% foram classificados como degenerados. Quanto às condições experimentais investigadas, verificou-se que o percentual de folículos normais variou de 60,8% a 87,9%, respectivamente nas condições experimentais T12C2 e T4C5. Já os folículos classificados como degenerados variam de 11,53% a 42,56% equivalentes às condições experimentais T12C2 e T4C5, respectivamente. O número de folículos ovarianos identificados no estudo variou de 52 a 124, respectivamente nas condições experimentais de T4C5 e T12C2. Na temperatura de 4°C com tempo de exposição de 4h a maior eficácia na conservação dos folículos (87,95%) foi na condição experimental que possuía como meio de conservação o extrato hidroalcoólico de própolis vermelha à 5% (T4C5). Já com tempo de exposição de 12h a maior eficácia na conservação dos folículos (71,53%) foi na condição experimental que possuía como meio de conservação o extrato hidroalcoólico de própolis vermelha à 5% (T12C5), implicando que a concentração de 5% mais recomendada como meio de conservação. A análise estatística indicou que o extrato hidroalcoólico de própolis vermelha de Alagoas preservou a morfologia folicular do tecido ovariano a depender da categoria avaliada nas condições experimentais investigadas. Entretanto, necessita-se de estudos mais detalhados para identificação da concentração mais viável do extrato frente a cada categoria folicular. |
| Abstract | The use of natural products with high antioxidant potential, such as red propolis from the State of Alagoas, may be a viable alternative for the conservation of oocytes during the transport of ovaries from animals of high zootechnical value, since they minimize the cellular damage caused by the oxidative stress by reducing blood supply. Thus, the aim of this study was to evaluate the use of red propolis hydroalcoholic extract as an alternative for conservation of cow ovarian follicles. The raw red propolis sample was purchased from an apiary located in the city of Marechal Deodoro, Alagoas, and subsequently the hydroalcoholic extract was obtained through the maceration technique using ethyl alcohol 70% v/v as extractor solvent. The antioxidant capacity of this solution was determined from the total phenol content and radical scavenging capacity against the 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazine (DPPH●) radical. From this stock solution, serial dilutions were performed until concentrations of 1 (C1), 2 (C2), 5 (C5) and 10% v/v (C10) were obtained, which were used as a means of preserving ovarian tissue. The study used ovaries (n=5 pairs) of adult cows, which were fragmented and stored at 4° C for 4 (T4) and 12 hours (T12), followed by classic histological processing. After obtaining the data, multivariate analyzes were performed with the average Euclidean distance as a measure of dissimilarity (D2) and the Tocher optimization method was applied. The hydroalcoholic extract of red propolis from Alagoas produced showed antioxidant capacity capable of preserving the follicular morphology of the ovarian tissue depending on the category evaluated in the experimental conditions investigated. The extract obtained showed a total phenol content of 462.25 ± 14.99 mg of gallic acid equivalents/g of dry extract and 32.12% inhibition against the DPPH● radical and IC50 of 10.06 µg mL-1. It was found that 27.8% of fresh control follicles remained intact (normal), while 72.2% were classified as degenerated. As for the investigated experimental conditions, it was verified that the percentage of normal follicles varied from 60.8% to 87.9%, respectively in the experimental conditions T12C2 and T4C5. The follicles classified as degenerated vary from 11.53% to 42.56% equivalent to experimental conditions T12C2 and T4C5, respectively. The number of ovarian follicles identified in the study ranged from 52 to 124, respectively in the experimental conditions of T4C5 and T12C2. At a temperature of 4°C with an exposure time of 4h, the greatest efficiency in the conservation of the follicles (87.95%) was in the experimental condition that had as a preservation medium the hydroalcoholic extract of red propolis at 5% (T4C5). With an exposure time of 12 hours, the greatest effectiveness in preserving the follicles (71.53%) was in the experimental condition that had 5% red propolis hydroalcoholic extract (T12C5) as a preservation medium, implying that the 5% concentration recommended as a means of conservation. Statistical analysis indicated that the hydroalcoholic extract of red propolis from Alagoas preserved the follicular morphology of the ovarian tissue depending on the category evaluated in the experimental conditions investigated. However, more detailed studies are needed to identify the most viable concentration of the extract for each follicular category. |
